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高效液相色譜進樣器的分類及使用注意事項   

更新時間:2021-03-02 瀏覽次數:[2919]
 高效液相色譜早期使用隔膜和停流進樣器,裝在色譜柱入口處,現在大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。
  HPLC進樣方式可分為:隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。
  1.隔膜進樣。用微量注射器將樣品注入專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內,可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得的柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產生記憶效應,使進樣重復性只能達到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規分析使用受到限制。
  2.停流進樣??杀苊庠诟邏合逻M樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動時往往會出現“鬼峰”,另一缺點是保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。
  3.閥進樣。一般HPLC分析常用六通進樣閥,其關鍵部件由圓形密封墊子(轉子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進樣量準確,重復性好(0.5%),操作方便。
  六通閥進樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。
 ?、儆貌糠盅b液法進樣時,進樣量應不大于定量環體積的50%(多75%),并要求每次進樣體積準確、相同。此法進樣的準確度和重復性決定于注器取樣的熟練程度,而且易產生由進樣引起的峰展寬。
 ?、谟?裝液法進樣時,進樣量應不小于定量環體積的5~10倍(少3倍),這樣才能*置換定量環內和流動相,消除管壁效應,確保進樣的準確度及重復性。
  六通閥使用和維護注意事項
  ①樣品溶液進樣前必須用0.45UM濾膜過濾,以減少微粒對進樣閥的磨損。
 ?、谵D動閥芯時不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動相受阻,使泵內壓力劇增,甚至超過泵的大壓力;轉到進樣位時,過高的壓力將使柱頭損壞。
 ?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣呂殘留在進樣閥中,每次分析結束后應沖洗進樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。
  4.自動進樣。用于大量樣品的常規分析。

蘇公網安備 32041202002137

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